Tutor 1

Hernández Rodríguez, Martha Patricia

Resumen

Introducción : la leptospirosis es una zoonosis causada por espiroquetas del género Leptospira spp. que pueden ser saprófitas o patógenas e infectar un mínimo de 174 especies animales. En el caso de la leptospirosis no existe un control totalmente efectivo; siendo importante la detección temprana del agente, por lo tanto, se hace necesario mejorar los procedimientos de detección y buscar alternativas para evitar su transmisión. Objetivo : realizar un estudio molecular del gen lipL32 de Leptospira spp. en porcinos de granjas bioseguras de Cundinamarca, Colombia. Materiales y Métodos: 9 cepas de Leptospira spp. previamente aislados de orina de porcino, y preservados a -70o C, fueron reactivadas y cultivadas. Se extenderá que los cultivos estarían libres de contaminantes y se compararán los procesos de extracción de ADN utilizando dos tiempos de incubación. Para la PCR se emplearon 3 formulaciones con el fin de amplificar el gen lipL32 (423 pb) Results : se extenderá que el tiempo de incubación óptimo fue de 3 horas; aunque, es posible obtener buenos resultados con un tiempo de incubación menor. Con los productos amplificados se terminaron, que de las tres formulaciones la que mejor resultado mostró, fue el número 3, con una concentración de cebador de 0,4 µM y un volumen final de 25 µL, que permitió amplificar la banda correspondiente de 423 pb al gen lipL32. Estos resultados muestran una reducción en la cantidad de reactivos sin comprometer la calidad de resultado; Esto implica, que se optimizan los reactivos incrementando el número de muestras que se pueden analizar con un kit para PCR. Conclusión: la optimización de los procesos de extracción y amplificación de ADN permite mejorar la identificación del agente por métodos moleculares, facilitando un diagnóstico temprano para instaurar medidas de control asociadas con los protocolos de bioseguridad en las granjas.

Palabras clave

Estudio molecular, Leptospira spp, Leptospirosis, Cuantificación ADN, PCR, Gen lipL32

Tipo de documento

Trabajo de grado - Pregrado

Licencia Creative Commons

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This work is licensed under a Creative Commons Attribution-Noncommercial-No Derivative Works 4.0 License.

Fecha de elaboración

2021

Programa académico

Biología

Facultad

Escuela de Ciencias Básicas y Aplicadas

Publisher

Universidad de La Salle. Escuela de Ciencias Básicas y Aplicadas. Biología

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Biology Commons

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