Efecto de los criopreservantes glicerol y dimetilformamida en el medio INRA 82 modificado sobre el espermatozoide canino

Abstract

Son diversos los estudios empleados a la técnica de criopreservación en semen canino haciendo énfasis en un mayor entendimiento de la crioinjuria sobre los espermatozoides del perro, teniendo en cuenta que el esperma de la especie canina es menos tolerante al congelamiento que otras especies , por ello gracias a dichos experimentos se busca una mayor preservación de la habilidad fertilizante, alcanzando mejores resultados de muestras seminales congeladas en los últimos años los estudios en criopreservación de semen canino ha avanzado y como consecuencia ha mejorado la supervivencia de los espermatozoides descongelados así como las tazas de parto en hembras inseminadas El presente proyecto tubo el propósito de comparar dos crioprotectores: glicerol y dimetilformamida, sometiendo las muestras seminales a una curva de congelación específica, y realizando evaluaciones de parámetros de calidad seminal en cada etapa del procesamiento del semen, como la dilución, la centrifugación, la refrigeración y posterior a la congelación. Para ello se trabajó con una muestra seminal de cinco caninos adultos de diferentes razas, con edades comprendidas entre uno y siete años de edad, los cuales se encontraron en buen estado de salud, evaluamos parámetros de calidad seminal en semen fresco como motilidad total, progresiva y vigor espermático. Cada eyaculado se diluyó en el medio INRA 82 modificado y se dividieron en dos partes, una con el criopreservante glicerol y a la otra la dimetilformamida, luego se determinó la concentración espermática, con el fin de obtener un volumen determinado de tal manera que tenga una concentración específica y deseada (100 x 10 6); las muestras seminales se distribuyeron en pajillas de 0.5 ml, para posteriormente ser sometidos al proceso de congelación. Finalmente las muestras se descongelaron (37° C por 30 a 60seg) y se evaluaron nuevamente empleando las pruebas de termorresistencia e hiposmótica. El desarrollo de este trabajo investigativo pudo generar mayor información respecto a la acción del diluyente INRA 82 (cuya composición fue modificada) sobre el semen del canino; y la interacción de éste con los crioprotectores glicerol y dimetilformamida.

There are several studies about the use of cryopreservation technique in canine semen, emphasizing a better understanding of the cryoinjury on the sperm of the dog, considering that the sperm of the canine is less tolerant than other species, thanks such experiments are seeking a greater preservation of fertilizing ability, achieving better results from semen samples frozen in recent years, studies on canine semen cryopreservation has advanced and as a result has improved the survival of thawed sperm and birth rates of inseminated females. This proyect was proposed to compare two cryoprotectants: glycerol and dimethylformamide, subjecting the semen samples at a specific freezing curve, and evaluating seminal quality parameters at each stage of processing of semen, as dilution, centrifugation, cooling and after freezing. For this reason it was worked with a semen sample of five adult dogs of different breeds, aged between one and seven years old, which were in good health, we evaluated semen quality parameters in fresh semen and total motility, progressive and spermatic vigor. Each ejaculate was diluted in INRA 82 medium, that was modified, later they was divided into two parts, one with the crioprotectant glycerol and other with the dimethylformamide, then the sperm concentration was determined in order to obtain a certain volume for having an specific concentration (100 x 10 6), the semen samples were divided into 0.5 ml straws and then were subjected to the freezing process. Finally the samples were thawed (37 C for 30 to 60sec) and evaluated using the test and the hyposmotic test The development of this research work could produce further information regarding the action of the diluent INRA 82 (whose composition was changed) on canine semen, and his interaction with the cryoprotectants glycerol and dimethylformamide.