Tutor 1

Neira Solano, Jorge Alberto

Resumen

Con el interés de mejorar las tasas de sobrevivencia y motilidad progresiva post-descongelacion de los espermatozoides equinos criopreservados, se realizó un estudio para evaluar el efecto de la asociación de la L-glutamina 80 mM (milimoles) + Etilenglicol 2.5%; comparado con tres protocolos diferentes: L-glutamina 80 mM + Glicerol 2.5%, Etilenglicol 2.5% y Glicerol 2.5%; para todos los protocolos se utilizó el medio INRA 97. Se trabajó con 4 reproductores criollos colombianos de los cuales se tomó un total de 21 muestras. La metodología de congelación utilizada fue: 60 minutos para descender la temperatura de 38°C a 5°C (0.55°C/min) y estabilizar la muestra a esta temperatura para el transporte. Se centrifugaron las muestras a 600 G durante 10 minutos y posteriormente se diluyó el semen con los diferentes protocolos. Una vez diluido, se tomaron 60 minutos de equilibrio en refrigeración; 20 minutos en vapores de nitrógeno líquido y posterior inmersión al nitrógeno líquido. Una vez realizada la congelación del material seminal con los diferentes protocolos en pajillas de 0.5ml, se realizó la evaluación post descongelación donde se observó la motilidad progresiva al tiempo 0, a los 30 y 60 minutos. Además se evaluó la sobrevivencia espermática utilizando la coloración eosina-nigrosina, al momento de la descongelación. De acuerdo a los análisis estadísticos (SAS) y la prueba de Tukey, no se encontraron diferencias significativas para la motilidad (p ≤ 0.6383) al tiempo 0, al tiempo 30 min. (p ≤ 0.511) y al tiempo 60 min.(p ≤ 0.1659); donde la media de motilidad al tiempo 0 para el protocolo 1 fue: 29,6 ± 15,1; para el protocolo 2: 28,1 ± 13,5; para el protocolo 3: 28,4 ± 12,3 y para el protocolo 4: 30,8 ± 11,1; la media de motilidad a los 30 minutos fue: para el protocolo 1: 25,1 ± 13,6; para el protocolo 2: 22,3 ± 13,0; para el protocolo 3: 24,9 ± 12,4 y para el protocolo 4: 25,5 ± 11,6 y la media de motilidad a los 60 minutos fue para el protocolo 1: 17,1 ± 10,2; para el protocolo 2: 15,4 ± 11,7; para el protocolo 3: 19,9 ± 11,5 y para el protocolo 4: 17,6 ± 10,4. En cuanto a la sobrevivencia espermática según el protocolo utilizado, no se encontraron diferencias significativas (p ≤ 0.6336) y las medias fueron: para el protocolo 1: 30,7; para el protocolo 2: 28,8; para el protocolo 3: 28,7 y para el protocolo 4: 31,7. En conclusión, aunque no se demostró diferencia significativa entre los protocolos; la tendencia a la media más alta la presentó el protocolo 4 (glicerol 2.5%). Sin embargo, por las características del etilenglicol, como bajo peso molecular, facilidad de penetración celular y bajos efectos tóxicos sobre la célula; se recomienda realizar nuevos trabajos con otras curvas de congelación disminuyendo el tiempo de exposición a vapores de nitrógeno líquido a 10 minutos y utilizar otros crioprotectantes tipo amidas.

Resumen en lengua extranjera 1

With the interest of improving the survival rates and progressive motility postthaw of the equine cry preserved sperms, a study was made to evaluate the effect of the association of the L-glutamine 80 mm (milimoles) + ethylene glycol 2.5%; compared with three different protocols: L-glutamine 80 mm + glycerol 2.5%, etilenglycol 2.5% and glycerol 2.5%; for all the protocols the INRA 97 medium was used. In the study 21 samples were taken from four colombian native stallions. The freezing methodology used was: 60 minutes to descend the temperature from 38°C to 5°C (0.55°C/min) and to stabilize the sample’s temperature to transport. The samples were put in a centrifuge at 600G for 10 minutes and after that the semen was diluted with the different protocols. Once diluted, 60 minutes were used to equilibrate the sample in refrigeration; 20 minutes in liquid nitrogen vapor and posterior immersion in liquid nitrogen. Once we completed the freezing section of the seminal material with the different protocols in straws of 0.5 ml, an evaluation postthaw was made where the progressive motility was observed at 0, 30 and 60 minutes. Also the spermatic survival rate was evaluated using eosin-nigrosine coloration, at unfreezing time. According to statistical analysis (SAS) and Tukey’s test, significant motility differences were not found (p ≤ 0.6383) at 0, at 30 (p ≤ 0.511) and at 60 minutes (p ≤ 0.1659); where motility average at time 0 for protocol 1 was: 29,6 ± 15,1; for protocol 2: 28,1 ± 13,5; for protocol 3: 28,4 ± 12,3 and protocol 4: 30,8 ± 11,1; the motility average at 30 minutes was, for protocol 1: 25,1 ± 13,6; for protocol 2: 22,3 ± 13,0; for protocol 3: 24,9 ± 12,4 and protocol 4: 25,5 ± 11,6; and the motility average at 60 minutes was for protocol 1: 17,1 ± 10,2; for protocol 2: 15,4 ± 11,7; for protocol 3: 19,9 ± 11,5 and protocol 4: 17,6 ± 10,4. About the spermatic survival rate according to the protocol used, significant differences were not found (p ≤ 0.6336). The averages were: for protocol 1: 30,7; for protocol 2: 28,8; for protocol 3: 28,7 and protocol 4: 31,7. In conclusion, although significant difference was not demonstrated between the protocols; the tendency to the highest average was presented by protocol 4 (glycerol 2.5%). However, for ethylene glycol characteristics, like low molecular weight, easiness of penetration cellular and low toxic effects on the cell; it is recommended to make new works with another freezing curves diminishing the exposition time to liquid nitrogen vapor to 10 minutes and to use other crioprotectants amides type.

Palabras clave

Equinos, Reproducción equina

Tipo de documento

Trabajo de grado - Pregrado

Licencia Creative Commons

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Fecha de elaboración

2006

Programa académico

Medicina Veterinaria

Facultad

Facultad de Ciencias Agropecuarias

Publisher

Universidad de La Salle. Facultad de Ciencias Agropecuarias. Medicina Veterinaria

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