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Tutor 1

Bello García, Felio Jesús

Tutor 2

Ayala, Martha

Tutor 3

Castellanos, Jaime

Resumen

El objetivo del presente trabajo fue evaluar la infección de Leishmania chagasi en un línea celular (Lulo), derivada de tejidos embrionarios de Lutzomyia longipalpis y, también, comparar este proceso infectivo con el desarrollado paralelamente en la línea celular J774. L. chagasi es el agente etiológico de la Leishmaniasis Visceral Americana. La cepa MH/CO/84/CI-044B de L. chagasi fue usada para la infección experimental en los cultivos celulares. Las células fueron sembradas sobre laminillas al interior de cajas con 24 pozos, en un número final de 2 x 103 células/pozo (100 microlitros/pozo). Los parásitos fueron adicionados a las células adheridas en una proporción de 10:1, las cuales fueron incubadas a 26°C y 37°C con presencia de CO2 en la línea celular Lulo y a 37°C con presencia y ausencia de atmósfera de CO2 en J774. Antes de efectuar el proceso de infección en las líneas celulares, se realizó un estudio morfométrico al día 3, 6 y 9 postsiembra; esto se repitió a las células infectadas a los días 3, 6 y 9 post-infección. Después de 3, 6 y 9 días de incubación, las células fueron lavadas con solución salina fisiológica 0.9%, fijadas con Metanol y teñidas con Giemsa al 10%. El porcentaje de infección y el índice de infección fueron determinados al contar el número de células infectadas y el número de amastigotes por célula. Los resultados mostraron una continua interacción de los promastigotes con las líneas celulares, siendo más intensa en J774. El mayor porcentaje de infección en las células Lulo fue registrado a temperatura de 37°C (20.8%), mientras que en las células J774 este porcentaje fue obtenido a 37°C en ausencia de CO2 (37.1%). El número de amastigotes fue mayor en la línea celular Lulo a 26°C (6.7), mientras que J774 fue mayor en ausencia de CO2 (11.1). En cuanto a la morfometría celular, se demostró un aumento significativo en el tamaño celular en Lulo a 26°C y J774 a 37°C con y sin atmósfera de CO2. Este trabajo mostró similitudes y algunas diferencias en el proceso de infección experimental de L. chagasi en las 2 líneas celulares, sin embargo, las células Lulo demostraron ser un modelo alternativo in vitro para el desarrollo del ciclo biológico de este patógeno.

Resumen en lengua extranjera 1

The objective of the present work was to evaluate the infection of Leishmania chagasi in a cellular line (Lulo), derived from embryonic weaves of Lutzomyia longipalpis and, also, to compare this infectivo process with the developed one parallelly in the cellular line J774. L. chagasi is the etiologic agent of the American Visceral Leishmaniasis. The MH/CO/84/CL044B stock of L. chagasi was used for the experimental infection in the cellular cultures. The cells were seeded on glass coverslips to the interior of boxes with 24 wells, in a final number of 2 x 103 cells/well (100 microliters/well). The parasites were added to the cells adhered in a proportion of 10:1, which were incubated to 26°C and 37°C with CO2 presence in the cellular line Lulo and to 37°C with presence and absence of CO2 atmosphere in J774. Before carrying out the process of infection in the cellular lines, a morphometric study to day 3, 6 and 9 was made post-sowing; this was repeated to the cells infected to days 3, 6 and 9 post-infection. After 3, 6 and 9 days of incubation, the cells were washed with physiological saline solution 0,9%, fixed with Methanol and dyed with Giemsa to 10%. The percentage of infection and the index of infection were determined when counting the number of infected cells and the number of amastigotes by cell. The results showed a continuous interaction of promastigotes with the cellular lines, being more intense in J774. The greater percentage of infection in the Lulo cells was registered to temperature of 37°C (20.8%), whereas in east the J774 cells percentage was obtained to 37°C in CO2 absence (37.1%). The number of amastigotes was greater in the cellular line Lulo to 26°C (6.7), whereas J774 was greater in CO2 absence (11.1). As far as the cellular morphometric, a significant increase in the cellular size in Lulo was demonstrated 26°C and J774 to 37°C with and without CO2 atmosphere work showed similarities and some differences in the process of experimental infection of L. chagasi in the 2 cellular lines, nevertheless, the Lulo cells demonstrated to be an alternative model in vitro for the development of the biological cycle of this pathogen.

Programa académico

Medicina Veterinaria

Palabras clave

Biología animal, Microorganismos, Parasitología veterinaria

Tipo de documento

Trabajo de grado - Pregrado

Licencia Creative Commons

Creative Commons Attribution-Noncommercial-No Derivative Works 4.0 License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-Noncommercial-No Derivative Works 4.0 License.

Fecha de elaboración

2005

Programa académico

Medicina Veterinaria

Facultad

Facultad de Ciencias Agropecuarias

Publisher

Universidad de La Salle. Facultad de Ciencias Agropecuarias. Medicina Veterinaria

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