Title
Effect of the association l-glutamine – ethylene glycol In equine semen cryopreservation
Resumen
Con el objeto de mejorar la eficiencia en la criopreservación de semen equino, se evaluó el efecto de la asociación L-glutamina con el Etilenglicol y Glicerol en el medio de congelación seminal. Se usaron 4 reproductores criollos colombianos para completar un total de 21 muestras que fueron congeladas en diferentes medios de congelación constituidos de medio INRA 97 y crioprotectante según estudio: Lglutamine 80mM + Etilenglicol 2,5% (protocolo 1), L-glutamine 80 mM + Glycerol 2,5% (protocolo 2), Etilenglicol 2,5% (protocolo 3) y glycerol 2,5% (protocolo 4). La metodología de congelación fue: 60 minutos para descender la temperatura de 38° C a 5° C (55° C/min) durante el transporte. Se centrifugaron las muestras a 600G/10min, se diluyó el semen con los 4 protocolos en pajillas de 5 ml. Luego 60 minutos de equilibrio en refrigeración; 20 minutos en vapores de nitrógeno líquido y posterior inmersión. En la evaluación de la motilidad progresiva no se encontró diferencia significativa entre protocolos al tiempo 0 (p ≤ 0.6383), al tiempo 30 min (p ≤ 0.511) y al tiempo 60 min (p ≤ 0.1659). Las medias de motilidad para los 4 protocolos al tiempo 0 fueron (1) 29,6 ± 15,1; (2) 28,1 ± 13,5; (3) 28,4 ± 12,3 y (4) 38 ± 11,1; a los 30 minutos: (1) 25,1 ± 13,6; (2) 22,3 ± 13,0; (3) 24,9 ± 12,4 y (4) 25,5 ± 11,6 y a los 60 minutos (1) 17,1 ± 12; (2) 15,4 ± 11,7; (3) 19,9 ± 11,5 y (4) 17,6 ± 14. La sobrevivencia espermática fue evaluada con coloración eosina-nigrosina, post-descongelación y no se encontró diferencia significativa entre los protocolos (p ≤ 0.6336), las medias fueron (1) 37; (2) 28,8; (3) 28,7 y (4) 31,7. En conclusión, aunque no se demostró diferencia significativa entre los protocolos; la tendencia a la media más alta la presentó el protocolo 4 (glicerol 2,5%).
Palabras clave
criopreservación, L-glutamina Etilenglicol, espermatozoide equino, semen equino
Abstract
In order to improve the effectiveness in the cryopreservation of horse sperm, the effect of association L-glutamine with Ethylenglicole and Glycerol in the freezing media spermatozoa was evaluated. 4 Colombian native stallions were used to complete a total of 21 samples which were frozen in two different media: INRA 97 and cryoprotectant. The following study was done: L-glutamine 80mM + Etilenglicol 2.5% (protocol 1), L-glutamine 80 mM + Glycerol 2.5% (protocol 2), Etilenglicol 2.5% (protocol 3) and glycerol 2.5% (protocol 4). The freezing methodology was: 60 minutes to descend the temperature from 38°C to 5°C (0.55°C/min) during the transport. The samples were centrifuged at 600G/10min., and the semen was diluted with the four protocols in straws of 0.5 ml. Then, 60 minutes of equilibrium in refrigeration; 20 minutes in liquid nitrogen vapors and then immersed. In the progressive motility evaluation there was not any significant difference between protocols at 0 time (p ≤ 0.6383), at 30 minutes (p ≤ 0.511), and at 60 minutes (p ≤ 0.1659). The motility averages for the 4 protocols at 0 time were (1) 29,6 ± 15,1; (2) 28,1 ± 13,5; (3) 28,4 ± 12,3 and (4) 38 ± 11,1; at the 30 minutes: (1) 25,1 ± 13,6; (2) 22,3 ± 13,0; (3) 24,9 ± 12,4 and (4) 25,5 ± 11,6, and at 60 minutes (1) 17,1 ± 12; (2) 15,4 ± 11,7; (3) 19,9 ± 11,5 and (4) 17,6 ± 14. The spermatic survival was evaluated with eosine-nigrosine coloration, after thawing and there was not any significant difference among the protocols (p≤ 0.6336), the average measures were (1) 37; (2) 28,8; (3) 28,7 and (4) 31,7. As a conclusion, although significant difference was not demonstrated among the protocols; the tendency to the highest average was presented by the protocol 4 (glycerol 2.5%).
Keywords
cryopreservation, L-glutamine ethylene glycol, equine spermatozoid
Fecha de recepción
13 de febrero de 2007
Fecha de aceptación
6 de septiembre de 2007
Fecha de publicación
January 2007
Licencia Creative Commons
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Tipo de documento
Artículo de investigación
Editorial
Universidad de La Salle. Ediciones Unisalle
Citación recomendada
Ramírez GF, Neira JA, León García SA y Moreno García DA. Efecto de la asociación L-glutamina – Etilenglicol en la Criopreservación de semen equino. Rev Med Vet. 2007;(14): 93-105.
