Elaboración de un anticuerpo monoclonal contra Leptospira interrogans serovar pomona

Abstract

La leptospirosis es una zoonosis de distribución mundial, más común en áreas tropicales donde las condiciones para su transmisión son favorables. Su incidencia a nivel mundial depende del clima, los reservorios, y su vigilancia; pero en Colombia estos índices no son bien valorados por la falta de investigaciones certeras en el tema. Es considerada una enfermedad ocupacional que afecta a personas que se dedican a la agricultura, limpieza de desagües, minería y aquellos que tienen contacto con animales como los trabajadores de famas y los veterinarios (Céspedes M, et.al, 2003; Slak A, et.al, 2007), sin contar que puede ser trasmitida por gran variedad de vectores como el agua y los roedores, aumentando de esta manera el riesgo de infección y propagación de la Leptospira spp. La técnica diagnóstica más utilizada para leptospirosis es la “Técnica de Aglutinación Microscópica” (MAT), esta prueba serológica detecta anticuerpos IgM, describe brotes recientes y puede distinguir animales infectados de animales vacunados sí se realizan muestreos pareados. Se encuentra otra serie de pruebas en el mercado, pero de especificidad y sensibilidad variables, por lo cual es necesaria la creación de nuevas técnicas que propendan por un mejor diagnóstico, eficaz, rápido y certero. El presente estudio llevó a cabo los procedimientos para intentar desarrollar un anticuerpo monoclonal específicos para Leptospira pomona. Para esto se prepararon antígenos de tipo sonicado y crudo, estos fueron inoculados a ratones Balb/c con seguimiento serológico para ver los títulos de anticuerpos producidos. Posteriormente los ratones fueron sacrificados y se extrajo el bazo para tomar los esplenocitos que se fusionaron con células de Mieloma, obteniendo de esta manera una gran cantidad de hibridomas, los cuales resultaron no reactivos a Leptospira pomona.

Leptospirosis is a worldwide zoonosis, more common on tropical areas where transmission conditions are favorable. Its worldwide incidence depends on the climate, vigilance and reservoirs, but in Colombia this indices are not well value due to the lack on specific investigation. It is consider an occupational sickness that affects people who works on agriculture, minery and cleaning waters, and those who have contact with animals as veterinarians and butchers. Its huge variety of vectors as water and rats increase the risk of infection and make leptospirosis an easy propagation sickness. The more frequently diagnostic test is Microscopic Agglutination Test (MAT), because is easy to perform and it has a low price. There are other tests on the market but its low specificity and multiple problems, establish the need of new techniques with better speed, and more accurate results. The present study gave up the procedures to develop monoclonal antibodies specific for Leptospira pomona. The antigens were prepare by sonicate and crude antigen and were inoculate to Balb/c mice’s. These mice’s were sampled for antibody titles and were slaughtered to extract the spleen. The splenocytes were fused with myeloma cells obtaining a large quantity of hibridomas, that were not reactive to Leptospira pomona.