Tutor 1

Chacón Jaramillo, Liliana

Tutor 2

Gómez Ramírez, Arlen Patricia

Resumen

El sexaje de embriones es una herramienta biotecnológica que aunque no es nueva en equinos, es importante para reducir costos en el criadero, porque permite al criador en el momento de transferir el embrión escoger el sexo de la cría antes de iniciar la gestación. El objetivo de esta investigacíon fue determinar el sexo en embriones equinos de siete días de edad por medio de la técnica de PCR (Reacción en cadena de la polimerasa) y comparar dos protocolos de PCR utilizando primers diferentes. Las céluas para extraer el ADN se obtuvieron por biopsia de los embriones recolectados mediante lavado uterino. En este estudio se realizó análisis bioinformático utilizando la base de datos de The National Center of Biotechnology Information (NCBI) con el fin de identificar secuencias de primers para el sexaje de embriones equinos, reportadas con anterioridad en la literatura. Posteriormente se procedió a estandarizar la técnica de PCR utilizando ADN obtenido de muestras de sangre de equinos hembra y macho adultos. Para observar el patrón de bandeo para los genes en los cromosomas X y Y obtenidos por la PCR utilizando una electroforesis en gel al 1.5%. Una vez estandarizada la técnica de PCR se realizó la extracción de ADN de células embrionarias de siete días de edad. Se compararon con la técnica de PCR dos grupos diferentes de primers y dos protocolos de PCR para la determinación del sexo. Al realizar la PCR con las células embrionarias se obtuvieron patrones de identificación de sexo con ambos protocolos. Ya con la técnica para sexaje estandarizada, se recomienda realizar estudios posteriores para perfeccionar la técnica de biopsia; conservación y transferencia de embriones sexados con el fin de obtener preñeces exitosas y con fines comerciales.

Resumen en lengua extranjera 1

The sexing of embryos is a biotechnology tool that although it is not new in horses, it is important to reduce costs in the stud farm, because it allows the breeder at the time of transferring the embryos to choose the sex of rearing before pregnancy. The objective of this research was to determine sex in equine embryos from six days of age using PCR (Polymerase chain reaction) and comparison of two PCR Protocols using different primers. The cells to extract the DNA were obtained by biopsy of embryos collected by uterine lavage. In this study bioinformatics analysis was conducted using the database of The National Center of Biotechnology Information (NCBI) in order to identify sequences of primers for the sexing of equine embryos, reported previously in the literature. Subsequently proceeded to standardize the PCR technique using DNA obtained from blood samples from adult horses male and female and using electrophoresis in gel at 1.5 % to observe the banding pattern soth for X and Y genes obtained by PCR. Once standardized the PCR technique cardes out the extraction of DNA from embryonic cells of seven days of age; it proceeded to perform PCR, comparing two different groups of primers and two protocols of PCR for sex determination. When performing PCR with embryonic cells were patterns of identification of sex with both protocols. Already with the technique for sexing standardized, further studies is recommended to improve the technique of biopsy, preservation and transfer of embryos sexed in order to obtain successful pregnancies and for commercial purposes.

Palabras clave

Fertilización in vitro, Análisis citogénico, Reacción de la polimerasa, Bioinformática, Embrión caballo

Tipo de documento

Tesis de maestría

Licencia Creative Commons

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Fecha de elaboración

2013

Programa académico

Maestría en Ciencias Veterinarias

Facultad

Facultad de Ciencias Agropecuarias

Publisher

Universidad de La Salle. Facultad de Ciencias Agropecuarias. Maestría en Ciencias Veterinarias

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