Tutor 1
Cardozo Cerquera, Jaime Antonio
Tutor 2
Herrera, Rocio Fenney
Tutor 3
Rueda, Fabian Leonardo
Resumen
Investigaciones anteriores adelantadas en Corpoica demostraron que toros criollos colombianos poseen mayor fertilidad In vitro, dichos estudios evidenciaron 49,7% y 38,9% de oocitos penetrados por espermatozoides de Sanmartinero y Brahman respectivamente. Sin embargo, no se conoce el porqué de estos resultados, por lo que esta investigación planteo como objetivo determinar los perfiles electroforéticos uni y bidimensionales de proteínas de membrana espermática de toros Brahman y criollo Sanmartinero, y establecer su relación con los parámetros (viabilidad, motilidad y concentración espermáticas) de calidad seminal, como acercamiento al entendimiento de la superior fertilidad del Sanmartinero. La técnica utilizada electroforesis uni y bidimensional permite caracterizar mezclas complejas de proteínas, identificando cambios cualitativos y cuantitativos derivados de las posibles diferencias raciales. Los trabajos iniciales permitieron estandarizar diferentes protocolos que abarcan desde la obtención de la muestra de proteínas, determinación de la cantidad de proteína a cargar, utilización de tampones de solubilización específicos y determinación del gradiente de concentración de poliacrilamida, para la obtención de geles con alta resolución de las bandas y puntos de proteína. El estudio se adelantó en espermatozoides de 10 toros Brahman y 10 toros Sanmartinero, localizados en el Centro de Investigación La libertad de CORPOICA, en los Llanos orientales. Se colectaron por electroeyaculación, tres muestras de semen por toro, a las que se les determinó la motilidad, concentración y viabilidad espermática. Las diferencias estadísticas entre razas se establecieron mediante la prueba de t student, y las correlaciones entre las concentraciones de las bandas y puntos de proteínas con las variables de calidad seminal, mediante la prueba de Pearson. Se establecieron los perfiles electroforéticos unidimensionales y los mapas bidimensionales referenciales de las proteínas de membrana espermática de toros Brahman y Sanmartinero. El análisis unidimensional evidenció la presencia de 36 bandas de proteína en Brahman y 32 en Sanmartinero, con pesos moleculares entre 11 kDa y 341 kDa. De 24 bandas detectadas en ambas razas, los toros Brahman presentaron siete con mayor concentración. En estos, seis bandas correlacionaron con las variables de calidad seminal, mientras que en los Sanmartinero solo se encontraron tres bandas. El análisis bidimensional evidenció la presencia de 487 puntos de proteína en toros Brahman, de los cuales 98 son exclusivos de esta raza, y 485 puntos en toros Sanmartinero, de los cuales 93 fueron exclusivos de ella. El peso molecular osciló entre 10.5 y 163.6 kDa y los puntos isoeléctricos entre 3.3 y 9.5. De los puntos detectados solo 57, fueron considerados para el análisis de diferenciación entre razas; de estos, 15 presentaron concentraciones superiores en Brahman y 2 en Sanmartinero. En los toros Brahman, 14 puntos correlacionaron con las variables de calidad seminal, y en los toros Sanmartinero solo correlacionaron 10. El estudio adelantado aportó nuevos datos sobre el proteoma de la membrana espermática de dos razas de la ganadería colombiana, y evidenció relaciones entre diversas proteínas y funciones importantes del espermatozoide, que pueden ser empleadas en la generación de estrategias de manejo para incrementar la eficiencia reproductiva del sistema de producción bovino.
Resumen en lengua extranjera 1
Previous investigations advanced in Corpoica demonstrated that Creole Colombian bulls has higher fertility in vitro, these studies showed 49,7 % and 38,9 % of oocytes penetrated by Sanmartinero sperms and Brahman respectively. However, it is not known why these results, for that reason the investigation express as target to determine the electrophoretic profiles one and two-dimensional of membrane spermatic proteins of bulls Brahman and Sanmartinero Creole, and to establish his relation with the parameters (spermatic viability, motility and concentration) of seminal quality, as approximation to the understanding the higher of Sanmartinero fertility. The used technique electrophoresis one and two-dimensional, allows to characterize complex mixtures of proteins, identifying qualitative and quantitative changes derivatives of the possible racial differences. The initial works allowed standardize different protocols that include from the obtaining the proteins sample, determination of the quantity of protein to load, utilization of specifics solubility tampons and determination of the gradient of polyacrylamide concentration, for the obtaining gel with high resolution of protein bands and points. The study was advanced in sperms of 10 Brahman bulls and 10 Sanmartinero bulls, located in the Investigation Center “La Libertad” of CORPOICA, in the oriental Plains. Were collected three samples of semen for bull by electroejaculation, which was established motility, concentration and spermatic viability. The statistical differences between breeds were established by t student test, and the correlations between the concentrations of the proteins bands and points with the variables of seminal quality by Pearson's test. Were established electrophoretic profiles one-dimensional and the two-dimensional referential maps of the proteins of spermatic membrane of Brahman and Sanmartinero bulls. The analysis unidimensional demonstrated the presence of 36 protein bands in Brahman and 32 in Sanmartinero, with molecular weights between 11 kDa and 341 kDa. of 24 bands detected in both breeds, the Brahman bulls showed seven with major concentration. In these, six bands correlated with the seminal quality variables, whereas the Sanmartinero only found three bands. The two-dimensional analysis showed the presence of 487 protein points in Brahman bulls, of which 98 are exclusive of this breed, and 485 points in Sanmartinero bulls, of which 93 were exclusive of these. The molecular weight ranged between 10.5 and 163.6 kDa and isoelectric points between 3.3 and 9.5. of the points detected only 57 were considered for the differentiation analysis between breeds; of these, 15 had higher concentrations in Brahman and 2 in Sanmartinero. In the Brahman bulls, 14 points correlated with the seminal quality variables and the Sanmartinero bulls correlated only 10. The anticipated study contributed new information on the proteome of spermatic membrane of two breeds of Colombian cattle breeding, and demonstrated relations between diverse proteins and important functions of the sperm, which can be used in the generation of management strategies to increase the reproductive efficiency of production of bovine system.
Palabras clave
Electroforesis, Geles de poliacrilamida, Proteómica, Viabilidad seminal
Tipo de documento
Trabajo de grado - Pregrado
Licencia Creative Commons
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Fecha de elaboración
2012
Programa académico
Medicina Veterinaria
Facultad
Facultad de Ciencias Agropecuarias
Citación recomendada
Restrepo Rubio, N. (2012). Perfiles electroforéticos 1D y 2D page de proteínas de la membrana del espermatozoide de toros brahmán y sanmartinero, y su relación con parámetros de calidad seminal. Retrieved from https://ciencia.lasalle.edu.co/medicina_veterinaria/462
Publisher
Universidad de La Salle. Facultad de Ciencias Agropecuarias. Medicina Veterinaria