Tutor 1
Mogollón Galvis, José Darío
Resumen
El objetivo del presente trabajo fue el de estandarizar la técnica de Inmunoperoxidasa indirecta, para la detección del antígeno viral del PRRS en tejidos fijados en formalina. Se tomaron al azar 54 casos de animales que presentaban lesiones compatibles con el síndrome respiratorio y reproductivo porcino (PRRS), que llegaron al Centro Nacional de Diagnóstico del Instituto Colombiano Agropecuario (ICA), situado en Santafé de Bogotá. Estos casos provenían de diferentes regiones del país. Para la evaluación de cada uno de los montajes, se inoculó un cerdo con la cepa ATCC VR 2332 que posteriormente fue sacrificado, tomando sus tejidos como control positivo. Los tejidos fueron sometidos al proceso rutinario de histotecnia y posteriormente se colorearon con Hematoxilina eosina para verificar la presencia de lesiones microscópicas características de la enfermedad, utilizando como referencia la presencia de neumonía intersticial y de esta manera justificar el montaje de la técnica. Para lograr la optimización de la técnica, se realizaron varios pasos y modificaciones según lo descrito en la literatura. Una vez estandarizada la prueba se realizaron montajes de los casos sospechosos anteriormente mencionados los cuales mostraron positividad clasificada en tres grados dependiendo del número de células marcadas. Para el estudio se dividieron las muestras en 2 grupos, Neonatos-Adultos (40 casos) y fetos (15 casos). Se tomaron tanto órganos blanco a la infección (Órganos linfoides y de tracto respiratorio de intercambio gaseoso), como otros para verificar si existía la presencia de antígeno viral. La técnica de Inmunoperoxidasa fue más eficaz en el grupo de Neonatos-Adultos donde se evidenció la presencia del virus en Pulmón (59.61%), órganos linfoides (tonsila 75%, timo 100%, bazo 66.6% y ganglio 53.57%), riñón (8%), y en hígado (9.67%). También se obtuvieron resultados positivos en placenta, pulmones fetales y órganos linfoides fetales, lo que sugiere la infección in-útero y la manifestación fetal. Se encontró evidencia de la interacción del PRRS con otros agentes como el Micoplasma y el Actinobacillus pleuroneumoniae. En el caso de Micoplasma, se observaron 26 casos donde existía asociación con PRRS y en el caso de Actinobacillus pleuroneumoniae asociado a PRRS, solamente 2 casos. Finalmente el estudio demostró la eficacia de la técnica de Inmunoperoxidasa Indirecta en el diagnóstico de PRRS. Se discute la importancia de los hallazgos.
Resumen en lengua extranjera 1
The objective of the present work was to standardize the indirect immunoperoxidase technique for the detection of the PRRS viral antigen in formalin-fixed tissues. 54 cases were taken at random from animals that presented compatible lesions with the porcine respiratory and reproductive syndrome (PRRS), that were sent to the Diagnostic National Center of the Colombial Agriculture Institute (ICA), located in Santafé de Bogotá. These cases came from different regions of the country. In order to have a positive control case, a conventional pig was inoculated with the ATCC VR 2332 strain and then slaughtered, to collect different positive tissues. The tissues were submitted to the rutinary histotechnical procedures and then stained with hematoxilin eosin to verify the presence of the characteristic microscopic lesions of this disease, like the Intersticial Pneumonia to justify the mounting of the technique. Several steps were conducted to standardize the technique. Once the procedures were standardized, the mountings were realized from the previously mentioned suspicious cases, which ones show a positive state, classified in three grades depending of the number of marked cells. For the study, the collected samples were divided in two groups, Neonates-Adults (40 cases) and Fetuses (15 cases). There were taken the specific target infection organs (Lymphoid organs and gas interchange respiratory tract), as well as other organs to confirm if exist the presence of viral antigen. The immunoperoxidase technique was more effective in the Neonates-Adult group in which the presence of the virus was evidenced in the Lung (59.61%), Lymphoid organs (Tonsil 75%, Thymus 100%, Spleen 66.6% and Ganglion 53.57%), Kidney (8%), and in the Liver (9.67%). There were also positive results in Placenta, Fetal Lungs and fetal lymphoid organs, which suggested that infection occurs in-uterus. The evidence of the interaction of PRRS with other agents, as Mycoplasma or Actinobacillus pleuroneumoniae. In the case of Mycoplasma, were observed 26 cases that had association with PRRS and in the case of Actinobacillus pleuroneumoniae associated with PRRS, just two cases. Finally the study demonstrate the efficacy of the indirect immunoperoxidase technique in the PRRS diagnosis. The importance of these findings was discussed.
Palabras clave
Síndrome reproductivo, Respiración porcina, Inmunoperoxidasa indirecta, PRRS, Enfermedades en porcinos
Tipo de documento
Trabajo de grado - Pregrado
Licencia Creative Commons
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Fecha de elaboración
2000
Programa académico
Medicina Veterinaria
Facultad
Facultad de Ciencias Agropecuarias
Citación recomendada
Bravo Quimbaya, M., & Mora Guzman, X. (2000). Aplicación de la técnica de inmunoperoxidasa para el diagnóstico del síndrome reproductivo y respiratorio porcino PRRS. Retrieved from https://ciencia.lasalle.edu.co/medicina_veterinaria/732
Publisher
Universidad de La Salle. Facultad de Ciencias Agropecuarias. Medicina Veterinaria