Tutor 1

Mossos Campos, Nestor Alfonso

Resumen

La Enfermedad de Gumboro (EG) representa una de las problemáticas más importantes para la avicultura en general debido al efecto inmunodepresor que ejerce sobre las aves afectadas, convirtiéndolas en susceptibles a otras infecciones. Con el fin de implementar sistemas de diagnóstico más rápidos y eficientes que permitan confirmar y a la vez diferenciar la EG de otras patologías que presentan signos clínicos similares, se estudiaron dos técnicas inmunohistoquímicas para el diagnóstico de la EG en tejidos, la Inmunofluorescencia (IF) y la Inmunoperoxidasa (IP). Para la estandarización de las pruebas se tomaron 60 pollitos SPF, los cuales fueron divididos en dos grupos; uno de 20 que conformó el grupo control y los 40 restantes clasificados como grupo experimental. Los pollitos fueron alojados en jaulas dentro de unidades de aislamiento del Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario del ICA en el CEISA. Las aves SPF del grupo experimental fueron inoculadas al día de edad con la cepa del virus de Gumboro 2512 suministrada por Laboratorios SPAFAS. Posterior a la inoculación, grupos de 15 pollitos de este grupo fueron sacrificados los días 5, 8 y 11 postinfección. Muestras de bolsas de Fabricio, Timo y Bazo fueron tomadas en cada sacrificio y procesadas para IP, IF e Histopatología. Complementariamente se tomaron muestras de suero con el fin de realizar serología por medio de la prueba de ELISA para demostrar reactivación de anticuerpos. Con el fin de valorar el comportamiento de la técnica en tejidos sospechosos de campo, se aplicaron las técnicas de IF y de IP a 55 casos procedentes de 24 empresas de diferentes regiones del país. Debido a que estas dos técnicas no discriminan entre el virus vacunal y virus de campo se diseñó un experimento en el que se evaluaba la persistencia del virus vacunal posterior a la inmunización con tres cepas vacunales existentes en el mercado. Los resultados demostraron que posterior a la inoculación de los pollitos SPF con la cepa 2512, a partir del día 5 y hasta el día 11 post-inoculación fue posible detectar el antígeno viral en las bolsas examinadas. Estos tejidos fueron empleados posteriormente como controles positivos de las pruebas Inmunohistoquímicas. La aplicación de la IF y la IP en tejidos de campo demostró ser una herramienta valiosa en la detección del virus sin encontrar diferencias entre estas dos técnicas. Posterior a la aplicación de la vacuna contra la EG, se encontró antígeno vacunal en las Bolsas de Fabricio hasta el día 12 post-vacunación, desapareciendo el virus de las Bolsas después de esta fecha de muestreo. Se concluye que las pruebas Inmunohistoquímicas para la detección del antígeno de la EG representan una herramienta valiosa para el diagnóstico de la enfermedad y que de manera práctica pueden servir de gran apoyo considerando que es mucho más difícil y dispendioso la demostración del virus mediante la aplicación de las técnicas convencionales.

Resumen en lengua extranjera 1

Infectious Bursal Disease is a major health problem in the Colombian poultry industry due to the immunosupresive effect on infected chickens witch became highly susceptible to other viral or bacterial diseases. The aim of this research was to develop a more efficient and quikly assay for the diagnosis of the Infectious Bursal Disease in Colombia following Histochemical methods such as Immunofluorescence (IF) and Immunoperoxidase (IP) from Fabricius bursa tissues. The first step was to standarize the IF and IP by using 60 one-day old with the 2512 IBDV strain supplied by SPAFAS inc Laboratories (USA). Chicks of the control and inoculated groups were located in separated cages in isolation units at the National Veterinary Diagnostic Laboratory CEISA from ICA in SantaFé de Bogotá. Fiftheen chicks from each group were killed at 5, 8 and 11 days after infection and samples from Bursa, Thimus and Spleen were collected for IP and IF studies. Furthermore, samples of serum for antibodies studies (ELISA) and tissues for microscopic examination were also collected. The second experiment was conducted in order to apply the IP and IF on field samples collected from 55 suspected infected chicken houses fron 24 different owners along the country. The finally part of this study was designed to know the time needed for the vaccine virus to persist in the bursa after vaccination of chickens with three different live vaccines using the IP and IF for detection of the residual virus in the tissue. The results showed that virulent virus can be detected in the bursa berween 5 and 11 days after experimental infection with the 2512 IBDV strain. The tissues were used as positive controls in the other two experiments. The IP and IF technic applied on field suspected cases of IBD showed to be a usefull tool for the diagnosis of the disease in tissue samples. There was no differences between this two methods to detect virus after natural or experimental infection in chickens tissues. On the other hand, vaccine virus was detected only until 12 days after vaccination. It is concluded that the use of IP and IF for IBD diagnosis in chickens is an important Immunochemical method for detecting virus on field samples. For this method be succesfully applied it is important to consider the vaccination program in order to avoid detection of vaccine virus in tissue samples collected fron 5 to 12 days after vaccination.

Palabras clave

Enfermedades de aves, Enfermedad de Gumboro, Avicultura

Tipo de documento

Trabajo de grado - Pregrado

Licencia Creative Commons

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Fecha de elaboración

2000

Programa académico

Medicina Veterinaria

Facultad

Facultad de Ciencias Agropecuarias

Publisher

Universidad de La Salle. Facultad de Ciencias Agropecuarias. Medicina Veterinaria

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